SDT细胞裂解液
含SDS与DTT的强效裂解液，提取动植物及微生物全蛋白，用于WB与质谱前处理。
产品货号：ED-8452
货期：1-2天
包装单位：瓶
ED-8452 SDT细胞裂解液由DingZ BIO提供，瓶装规格，现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂，品质稳定可靠，适用于科研院所与生物医药企业，快速交付。
配方组成
| 成分 | 终浓度 |
|---|---|
| SDS | 4 %(w/v) |
| Tris-HCl | 100 mM |
| DTT | 0.1 M |
浓度为成品中的终浓度。需要不同浓度、pH 或规格，可点上方「基于此产品定制」。
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保存条件
4℃保存，有效期6个月。-20℃保存，有效期1年。
概述
SDT 裂解液是一种强效的蛋白质提取缓冲液，专为提取动物、植物及微生物样本的全蛋白而设计。其含有高浓度的离子型去垢剂SDS和强还原剂DTT，能够迅速破坏细胞膜结构，使蛋白质二级结构及疏水键断裂，彻底变性并溶解。
推荐应用： Western Blot、蛋白质组学（LC-MS/MS）质谱前处理。
实验限制：本品含有高浓度SDS和DTT会导致蛋白完全变性，不适用于免疫共沉淀（IP/Co-IP）、酶活性检测等需要保留蛋白天然构象的后续实验。
使用建议
1. 准备工作
高浓度SDS在低温下易析出。使用前请检查，若有白色结晶，请置于37℃水浴加热并轻晃，待完全溶解后再使用。本品含有DTT，建议分装冷冻保存，避免反复冻融。
2. 组织/细胞裂解
l 组织样本：称取约100 mg组织（提前剪碎），按照1:10 (W/V) 的比例加入1 mL SDT细胞裂解液（如增加或减少组织量则相应调整SDT细胞裂解液用量）。
初步匀浆（组织样本）：使用机械匀浆器（推荐60 Hz, 45-60s）直至样本充分破碎（若无设备则尽可能剪碎组织样本，不过匀浆是更优选择）。
l 细胞样本：收集细胞沉淀，按每1×107细胞加入500μL–1mL裂解液（可不做初步匀浆）。
3. 热变性与降粘
(1) 首次加热：将裂解液置于100℃（沸水浴或金属浴）加热3-5分钟。此步骤可迅速使蛋白变性并灭活蛋白酶。
(2) 探头超声：为剪切基因组DNA并降低样本粘度，建议进行超声破碎（参考功率40-50W，超声5s，间隔5s，循环6-10次）。
(3) 二次加热：再次置于100℃加热2分钟。
4. 离心收集
(1) 室温（约25℃）下，13,000×g（或有条件使用更高转速16,000×g）离心10-15分钟。
(2) 小心吸取上清，即为提取的蛋白，可立即实验或-80℃保存。
注意事项
1. 本品提取蛋白不适用常规BCA法（DTT会还原铜离子导致变色）和Bradford 法（SDS干扰），可选择EK-5004 Bradford蛋白浓度测定试剂盒（去垢剂兼容型）。
2. 如若后续用于质谱分析，样本在进行酶解前必须通过 FASP（滤膜辅助制备）或丙酮沉淀法彻底去除其中的SDS。
3. 本品含有还原剂（臭味）及刺激性化学品，请在通风橱中操作，并佩戴实验服、手套及护目镜。
4. 该试剂仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。