变性裂解液（8M urea，100mM NaH2PO4，100mM Tris-HCl，pH 8.0） 500ml

保存条件

室温保存，有效期12个月

概述

本试剂为高浓度尿素变性裂解液，配方包含8M Urea，100mM NaH₂PO₄及100mM Tris-HCl，pH值精确调节至8.0。该缓冲体系具有极强的增溶能力，能够有效提取细胞、组织或包涵体中高度疏水及难溶性的蛋白质。其pH 8.0的缓冲环境与多种亲和层析填料（如镍柱纯化）具有良好的兼容性，是蛋白质组学样本预处理、蛋白质免疫印迹（Western Blot）制样以及大规模蛋白质纯化过程中的理想变性裂解试剂，能够最大限度地减少蛋白酶活性及蛋白质的错误折叠与聚集。

使用方法

1. 根据样本类型，按照每10⁷个细胞或100mg组织加入500-1000μL裂解液的比例进行添加，对于包涵体样本，建议直接将沉淀重悬于裂解液中。
2. 充分涡旋振荡或使用超声波破碎仪进行处理，在室温或4℃下保持震荡孵育30-60分钟，确保蛋白质完全暴露在变性环境中。
3. 将混合液在4℃下以12000-15000rpm的离心力离心15-20分钟，收集含有目标变性蛋白质的上清液，即可直接进行下游的电泳分析或进一步的层析纯化。

注意事项

1. 尿素在高温下易发生分解产生氰酸盐，可能导致蛋白质氨基末端的氨基甲酰化修饰，因此建议在使用时避免长时间加热，若需配制下游实验样本，应现配现用。
2. 本产品含有高浓度尿素，具有潜在的化学刺激性，操作过程中必须佩戴防护手套、护目镜及实验服，避免皮肤接触及吸入气溶胶，若不慎接触皮肤请立即用大量流动清水冲洗。
3. 请将本试剂储存于避光、干燥且阴凉的环境中，严禁在室温下长期暴露。