中性红染色液(无菌,0.33%)
无菌0.33%中性红染色液,用于活细胞溶酶体染色与固定样本复染。
产品货号:ED-8277
浓度:0.33%
质量等级:无菌
货期:1-2天
包装单位:瓶
ED-8277 中性红染色液(无菌,0.33%)由DingZ BIO提供,瓶装规格,现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂,品质稳定可靠,适用于科研院所与生物医药企业,快速交付。
配方组成
| 成分 | 终浓度 |
|---|---|
| 中性红 | 0.33 %(w/v) |
| 溶剂 | DPBS(无钙镁) |
浓度为成品中的终浓度。需要不同浓度、pH 或规格,可点上方「基于此产品定制」。
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保存条件
4℃避光保存,有效期12个月
概述
中性红(Neutral Red)是一种弱碱性pH指示剂(变色范围 pH 6.8-8.0,由红变黄)。
活细胞染色:中性红能穿透细胞膜并在酸性的溶酶体中蓄积,将其染成鲜红色,常用于细胞生活力鉴定及毒性试验。
固定样本染色:细胞固定后,其酸性环境被破坏,中性红转而与细胞核内的 DNA/RNA 结合,使细胞核呈现深红色,胞浆呈现浅红色。
无菌保证:本品经 0.22μm微孔滤膜过滤除菌,可直接用于细胞培养相关的无菌操作。
使用建议
应用方案A:活细胞溶酶体摄取实验 (NRU Assay)
1. 铺板与处理:在96孔板中培养细胞并进行药物处理。
2. 孵育:移除培养基,加入含10%中性红染色液的培养基(即中性红稀释至0.033%)。
3. 摄取:在37°C、5% CO2培养箱中孵育2-3小时。
4. 洗涤与观察:弃去染色液,用预冷的PBS洗涤一次。活细胞溶酶体呈现清晰的红色颗粒。
应用方案 B:组织切片或固定细胞的复染
1. 样本脱蜡/固定:
石蜡切片:经二甲苯脱蜡、梯度乙醇降级复水至蒸馏水。
细胞爬片:使用适当固定液(如ES-8100 4%组织/细胞固定液)固定 15 min,蒸馏水洗涤。
2. 染色:滴加中性红染色液,室温避光染色10-30分钟。
注:作为复染(如配合大肠杆菌染色或碱性磷酸酶染色)时,时间建议控制在2-5分钟。
3. 分化与洗涤:蒸馏水快速冲洗。若染色过深,可用95%乙醇稍作分化。
4. 封片:湿片可直接观察。永久封片:需经无水乙醇极速脱水(因中性红极易溶于乙醇),二甲苯透明,中性树胶封片。
注意事项
1. pH环境敏感性:洗涤水的pH值直接影响显色。若颜色偏橙黄,说明环境偏碱,可改用微酸性水(加极少量醋酸)洗涤以恢复鲜红色。
2. 防止褪色:中性红是非永久性染料,在阳光直射下易褪色,观察及保存过程请注意避光。
3. 安全性:虽然本品经过滤除菌,但仍具有一定生物毒性,操作时请穿戴标准防护装备(手套/口罩/实验服)。
科研声明:本试剂仅供科学研究使用,严禁用于临床医疗、诊断或食品添加。