5×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液(DTT)
5×SDS-PAGE上样缓冲液,含DTT与溴酚蓝,加热变性后使用。
产品货号:ED-8129
浓度:5×
货期:现货
包装单位:瓶
ED-8129 5×SDS-PAGE单色蛋白上样缓冲液(DTT)由DingZ BIO提供,瓶装规格,现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂,品质稳定可靠,适用于科研院所与生物医药企业,快速交付。
配方组成
| 成分 | 终浓度 |
|---|---|
| Tris-HCl | 312 mM |
| SDS | 10 %(w/v) |
| 甘油 | 50 %(v/v) |
| 溴酚蓝(钠盐) | 0.5 %(w/v) |
| DTT | 0.5 M |
浓度为成品中的终浓度。需要不同浓度、pH 或规格,可点上方「基于此产品定制」。
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保存条件
-20℃避光保存,有效期12个月(建议分装冻存,避免反复冻融)
概述
本产品为经过优化的 5 倍浓缩蛋白上样缓冲液,专门用于蛋白质变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的样本制备。
变性原理:本产品利用SDS掩盖蛋白电荷差异并破坏氢键,结合DTT高效还原二硫键,使蛋白质彻底去折叠并带上均一负电荷。经变性后的蛋白亚基转化为线性分子,在电泳中的迁移率仅与其分子量相关。
保护功能:本品使用特殊的缓冲体系可防止蛋白在加热变性过程中发生热降解,并维持电泳过程中的pH环境稳定。
可视化:含有溴酚蓝(Bromophenol Blue)染料,便于样本加样及电泳过程监控。
使用建议
1. 复溶:将5×蛋白上样缓冲液从-20°C取出,置于室温或37°C水浴中彻底融化并充分混匀。
2. 混合:按照4:1的比例将蛋白样品与上样缓冲液混合(即40μL蛋白样品中加入10μL本品)。注:若蛋白浓度过高,可使用去离子水或PBS提前稀释。
3. 变性:混匀后,置于80–100°C水浴或金属浴中加热5-10分钟。
4. 离心:冷却至室温后,12,000 × g 离心2–5分钟(旨在沉降变性可能产生的少量不溶物及冷凝液,无沉淀亦正常现象)。
5. 上样:取上清液直接加样于凝胶孔中进行电泳。
注意事项
1. SDS析出:在-20°C下SDS极易产生结晶,使用前务必确保沉淀完全溶解。若有必要,可37°C 短时间温育。
2. pH 指示色变:缓冲液中的溴酚蓝对pH敏感。在低温或微酸性环境下可能呈现深棕色,变性加热或进入电泳槽(pH 8.8体系)后会恢复正常的蓝色,不影响产品质量。
3. 安全防护:仅限科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。