缓冲液

EDTA脱钙液(14%,pH 7.2) 500ml

14% EDTA脱钙液,pH 7.2,温和脱钙,适合骨组织IHC与ISH。

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产品货号:ED-8692
规格:500ml
浓度:14%
货期:1-2天
包装单位:瓶

ED-8692 EDTA脱钙液(14%,pH 7.2)由DingZ BIO提供,瓶装规格,现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂,品质稳定可靠,适用于科研院所与生物医药企业,快速交付。

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现货通常 1–3 个工作日发出
低温试剂按保存温度冷链发货
仅供科研使用(RUO),不得用于临床

配方组成
成分终浓度
EDTA(游离酸) 14 %(w/v)
pH 7.2

浓度为成品中的终浓度。需要不同浓度、pH 或规格,可点上方「基于此产品定制」。

保存条件

室温保存,有效期12个月

概述

含钙组织(如骨骼、牙齿或钙化肿瘤组织)由于钙盐硬度极大,无法直接进行石蜡包埋切片。必须在固定后进行脱钙处理,使组织变软。EDTA脱钙速度较慢,通常需要数周。

作用机制:EDTA(乙二胺四乙酸)是一种螯合剂,它能与骨盐中的钙离子结合形成可溶性的螯合物,从而缓慢地去除钙盐。

产品优势:

1. 抗原保护:相比酸性脱钙液,EDTA环境温和,对组织结构和酶活性影响极小,是免疫组化 (IHC) 和原位杂交 (ISH) 的首选。

2. 形态稳定:不会引起组织肿胀或损害纤维结构。

操作方法

1. 取材:骨组织取材厚度建议控制在5 mm以内。组织块越薄,脱钙效率越高。

2. 固定(关键):组织应先经4%组织/细胞固定液(ES-8100)固定24–48 小时。 注:严禁未固定直接脱钙,否则会导致组织自溶。

3. 漂洗:固定后,用PBS或蒸馏水漂洗3次,每次20分钟。

4. 脱钙:将组织浸泡在20-30倍体积的EDTA脱钙液中。密封容器,置于平摇床上缓慢晃动以提高效率。更换频率:每3-7天更换一次新鲜脱钙液。

5. 后续:脱钙完成后,用蒸馏水充分冲洗,即可进行后续的脱水、包埋程序。

脱钙终点的测定

准确判断脱钙终点是保证切片质量的关键:

1. 物理检测法(常用):用针头刺入组织,若无阻力、手感柔软且无“砂砾感”即可终止。注意避免在重要观察部位穿刺。

2. X线检测法(最准确):通过 X 光片观察骨组织影像,若密度降至软组织水平,则脱钙彻底。

3. 化学检测法:取少量脱钙旧液,加入等量草酸铵溶液,若无浑浊产生,说明已无钙离子释出。

注意事项

1. 容器选择:必须使用玻璃或塑料容器。禁止使用金属容器,因为EDTA会腐蚀金属并干扰螯合反应。

2. 温度控制:适当加温可加速脱钙,但绝对不可超过 60°C,否则会导致骨组织胶原纤维变性。

3. 彻底冲洗:脱钙结束后必须用蒸馏水充分冲洗,残留的 EDTA 可能会干扰后续的苏木素(Hematoxylin)染色。

4. 时间控制:脱钙不足会导致切片崩刀、碎裂;脱钙过度(极长期浸泡)则可能导致组织结构松散。

5. 安全防护:本品为科研试剂,请穿实验服并戴一次性丁腈手套操作。