缓冲液

1×流式破膜缓冲液(Saponin)(破膜剂)

流式胞内抗原检测用破膜剂,Saponin温和打孔,需全程保持其存在。

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产品货号:ED-8648
质量等级:细胞培养级
货期:1-2天
包装单位:瓶

ED-8648 1×流式破膜缓冲液(Saponin)(破膜剂)由DingZ BIO提供,瓶装规格,现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂,品质稳定可靠,适用于科研院所与生物医药企业,快速交付。

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  • 规格

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现货通常 1–3 个工作日发出
低温试剂按保存温度冷链发货
仅供科研使用(RUO),不得用于临床

保存条件

4ºC避光保存(请勿冷冻),有效期12个月

概述

本产品专门用于流式细胞术中胞内抗原检测的破膜处理。

作用机制:Saponin (皂苷) 是一种非离子型表面活性剂,能与细胞膜上的胆固醇特异性结合,诱导形成跨膜小孔(直径约8-10 nm)。

产品特点:

1. 温和性:相比 Triton X-100 等强力去垢剂,Saponin 对细胞形态(FSC/SSC)的影响较小,能较好地保护抗原表位。

2. 可逆性:Saponin 的破膜作用是可逆的。必须在整个染色和洗涤步骤中始终保持破膜剂的存在,否则胞内孔道会闭合,导致抗体无法洗出或结合。

操作方法】
以下流程以检测胞内细胞因子为例,仅供参考:

1. 细胞收集:收获待测细胞(约1×106个),4°C、300–500 g (约1000–1500 rpm) 离心5分钟,弃上清。

2. 固定:加入500 μL预冷的固定液(推荐ED-9028 流式细胞固定液),室温孵育10–20分钟。注:必须先固定后破膜,以锁定胞内蛋白质结构。

3. 洗涤:离心后弃上清,加入1 mL PBS 洗涤一次。

4. 破膜:弃上清,加入1.5 mL 1×流式破膜缓冲液 (Saponin),室温孵育15分钟。

5. 离心:300–500 g 离心5分钟,弃上清。

6. 抗体孵育:使用100 μL 1×流式破膜缓冲液重悬细胞,加入荧光标记的检测抗体,避光孵育30分钟。专业提示:此步必须使用破膜液而非普通 PBS,以维持膜孔开启状态。

7. 洗涤与上机:加入1–2 mL破膜液洗涤一次,离心弃上清后,用500 μL流式染色缓冲液(或PBS)重悬,立即上机分析。

【注意事项

1. 维持破膜状态:Saponin的破膜效应在去除药剂后会消失。因此,从破膜开始到染色结束的所有洗涤和稀释步骤,均应使用本破膜缓冲液。

2. 防止挥发:表面活性剂溶液易产生气泡或挥发,用后请及时拧紧瓶盖。

3. 安全防护:仅限科研使用。操作时请穿实验服、戴一次性手套,避免接触皮肤和眼睛。