嘌呤霉素溶液(1mg/mL)
1 mg/mL无菌嘌呤霉素溶液,用于稳定转染细胞的筛选与杀灭曲线建立。
产品货号:ED-8566
浓度:1mg/ml
质量等级:无菌
货期:现货
包装单位:瓶
ED-8566 嘌呤霉素溶液(1mg/mL)由DingZ BIO提供,瓶装规格,现货供应。属于其它缓冲液类生物科研试剂,品质稳定可靠,适用于科研院所与生物医药企业,快速交付。
配方组成
| 成分 | 终浓度 |
|---|---|
| 嘌呤霉素二盐酸盐 | 1 mg/mL |
| HEPES | 20 mM |
| pH | 7.3 |
| 溶剂 | dH2O |
浓度为成品中的终浓度。需要不同浓度、pH 或规格,可点上方「基于此产品定制」。
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保存条件
-20℃保存,有效期12个月
概述
嘌呤霉素 (Puromycin) 是由Streptomyces alboniger分泌的一种氨基糖苷类抗生素。它不仅能抑制革兰氏阳性菌,对多种动物及昆虫细胞具有极强的杀伤力。
作用原理:嘌呤霉素是氨酰-tRNA 3'末端的类似物,能竞争性结合核糖体A位点并掺入延伸中的肽链,导致肽链合成提前终止并释放不成熟的多肽碎片,从而高效阻断蛋白质合成。
筛选原理:含有pac基因 (编码嘌呤霉素乙酰转移酶) 的稳定转染细胞可将嘌呤霉素乙酰化,从而使其失去活性,获得抗性。
物理指标:采用0.22 μm滤膜过滤除菌,可直接用于细胞培养。
使用建议
1. 建立杀灭曲线 (Kill Curve) ——关键步骤
由于不同细胞系对嘌呤霉素的敏感性差异巨大,首次实验务必进行梯度测试以确定最小有效致死浓度:
建议浓度梯度:在完全培养基中加入 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL 的嘌呤霉素。
观察指标:每天观察细胞死亡率,通常以2-4天内导致 100% 非转染细胞死亡的最低浓度为实验最佳工作浓度。
2. 常用筛选浓度参考
哺乳动物细胞:常用工作浓度范围为1–10 μg/mL。
大肠杆菌 (E. coli):筛选稳定转化pac基因的菌株,建议浓度为100–125 μg/mL。
注意事项
1. pH 敏感性:嘌呤霉素在酸性条件下活性迅速下降。对于长期筛选实验,建议每 2-3 天更换含有新鲜抗体的培养基。
2. 安全防护:为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。