嘌呤霉素溶液（10mg/mL） 1ml

保存条件

-20℃保存，有效期12个月

概述

嘌呤霉素 (Puromycin) 是由Streptomyces alboniger分泌的一种氨基糖苷类抗生素。它不仅能抑制革兰氏阳性菌，对多种动物及昆虫细胞具有极强的杀伤力。

作用原理：嘌呤霉素是氨酰-tRNA 3'末端的类似物，能竞争性结合核糖体A位点并掺入延伸中的肽链，导致肽链合成提前终止并释放不成熟的多肽碎片，从而高效阻断蛋白质合成。

筛选原理：含有pac基因 (编码嘌呤霉素乙酰转移酶) 的稳定转染细胞可将嘌呤霉素乙酰化，从而使其失去活性，获得抗性。

物理指标：采用0.22 μm滤膜过滤除菌，可直接用于细胞培养。

使用建议

1. 建立杀灭曲线 (Kill Curve) ——关键步骤

由于不同细胞系对嘌呤霉素的敏感性差异巨大，首次实验务必进行梯度测试以确定最小有效致死浓度：

建议浓度梯度：在完全培养基中加入 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL 的嘌呤霉素。

观察指标：每天观察细胞死亡率，通常以2-4天内导致 100% 非转染细胞死亡的最低浓度为实验最佳工作浓度。

2. 常用筛选浓度参考
哺乳动物细胞：常用工作浓度范围为1–10 μg/mL。
大肠杆菌 (E. coli)：筛选稳定转化pac基因的菌株，建议浓度为100–125 μg/mL。

注意事项

1. pH 敏感性：嘌呤霉素在酸性条件下活性迅速下降。对于长期筛选实验，建议每 2-3 天更换含有新鲜抗体的培养基。

2. 安全防护：为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。