电镜固定液 (2%戊二醛-2%多聚甲醛混合型)

保存条件

4℃避光储存，有效期12个月

概述

电镜固定（Fixation）的成败直接决定了超微结构（如线粒体嵴、突触、核孔复合体）的真实性。

l 双组分协同：本品采用经典的 Karnovsky’s 改良配方。多聚甲醛 (2%) 分子量小，渗透极快，负责瞬时锁定组织形态；戊二醛 (2%) 具有双官能团，提供极强的蛋白质共价交联，确保在后续脱水和包埋过程中结构不塌陷。

l 理化标准：采用0.1 M磷酸盐（PB）为缓冲体系，pH 7.4。渗透压经过精确调校，避免组织细胞发生人为的皱缩或膨胀。

使用方法

1. 极速取材：组织离体后应在1分钟内投入预冷的固定液中。
注：延迟固定会导致严重的细胞自溶干扰。

2. 精细切块：在固定液滴中，使用锋利刀片将组织迅速切成1 mm³的小方块。
专业提示：切块必须在液滴中进行，防止组织表面干燥或受机械挤压。

3. 固定程序：4°C避光固定2-4小时。
对于致密组织（如骨骼、角质层），可延长固定时间至12–24小时。

4. 后处理：固定结束后，使用0.1 M PB缓冲液（ED-8448 0.1M 磷酸缓冲液PB(pH7.4)）漂洗3–5次，随后转入锇酸后固定流程。

注意事项

1. 标本尺寸限制：电镜固定的物理极限极高。常规病理厚度（>3mm）会导致组织中心出现“空洞化”坏死。务必保持组织块在 1mm³左右。

2. 严控温度：整个过程建议在4°C进行，以最大限度抑制内源性酶的降解活动。

3. 固定液体积要求：为确保固定液浓度的恒定及渗透压的稳定，固定液的体积应至少为组织块体积的10–20倍。

4. 安全防护：戊二醛与多聚甲醛均具有强刺激性及潜在致癌性，为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。